實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是DNA定量技術(shù)的一次飛躍

    實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是DNA定量技術(shù)的一次飛躍。運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù)，我們可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量和定性分析。定量分析包括定量分析和相對(duì)定量分析。前者可以得到某個(gè)樣本中基因的拷貝數(shù)和濃度;后者可以對(duì)不同方式處理的兩個(gè)樣本中的基因表達(dá)水平進(jìn)行比較。除此之外我們還可以對(duì)PCR產(chǎn)物或樣品進(jìn)行定性分析：例如利用熔解曲線分析識(shí)別擴(kuò)增產(chǎn)物和引物二聚體，以區(qū)分非特異擴(kuò)增;利用特異性探針進(jìn)行基因型分析及SNP檢測等。目前實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于基礎(chǔ)科學(xué)研究、臨床診斷、疾病研究及藥物研發(fā)等領(lǐng)域。其中主要的應(yīng)用集中在以下幾個(gè)方面：
    DNA或RNA的定量分析。包括病原微生物或病毒含量的檢測，轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物拷貝數(shù)的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。
    基因表達(dá)差異分析。例如比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等)，特定基因在不同時(shí)相的表達(dá)差異以及cDNA或差顯結(jié)果的確證。
    基因分型。例如SNP檢測，甲基化檢測等。
    熒光定量PCR儀對(duì)病原體檢測和遺傳是怎樣的應(yīng)用？
    病原體檢測：
    目前，采用熒光定量PCR儀檢測技術(shù)可以對(duì)淋球菌、沙眼衣原體、解脲支原體、人類乳頭瘤病毒、單純皰疹病毒、肝炎病毒、結(jié)核桿菌、細(xì)小病毒B19、EB病毒和人巨細(xì)胞病毒等病原體進(jìn)行定量測定。與傳統(tǒng)的檢測方法相比具有靈敏度高、取樣少、快速簡便等優(yōu)點(diǎn)。
    遺傳及優(yōu)生優(yōu)育診斷：
    到目前為止，人們對(duì)遺傳性物質(zhì)改變引起的遺傳性疾病還無法治療，只能通過產(chǎn)前監(jiān)測，減少病嬰出生，以防止各類遺傳性疾病的發(fā)生，如為減少X連鎖遺傳病患兒的出生，從孕婦的外周血中分離胎兒DNA，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測其Y性別決定區(qū)基因是一種無創(chuàng)傷性的方法，易為孕婦所接受。例外還可以通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR對(duì)孕婦弓形蟲，梅毒等檢測，這對(duì)找出不明原因流產(chǎn)和習(xí)慣性流產(chǎn)的病因提供有力的幫助，大大提高優(yōu)生優(yōu)育。